细胞传代

大部分来自实体组织器官的细胞是贴壁生长的，它们在机体内，也是与其【qí】他【tā】细胞或细胞外基质结合的。

在贴壁的过程中，细【xì】胞【bāo】首先分泌细胞外基质，这种细胞外基质黏附在支持物的表面（如培养瓶、培养皿的底面）。细胞通过其表面的黏附因子与这些细胞外基质结合。所以细胞贴壁与否与细胞【bāo】本身分泌细胞外基质的能力以及细胞本身表达【dá】的黏附分子的数量有关，也与培养皿壁的表面结构有关。

大口无碰撞

但细胞将培养瓶底部占满时，需要采用细胞消化的方【fāng】法将细胞从【cóng】细胞培养瓶上剥落，传代转移到其他培养【yǎng】器皿中继续培养，此时如何高效收获细胞，如何提高细胞回收率成为重中之重。总担心遗【yí】漏了角角落落的细胞，或是用力过猛损害细胞健康？总是担心刮刀蹭到瓶口导致污染？总是害怕移液时撞到瓶子移液不准？不用担心，耐思来助力！

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传代密度过高

一旦细胞养太久至融合度过高（>90%）才【cái】传代，容易使细胞产生老化现象，甚至是堆叠，再消化细胞时不易吹打成单颗细胞，即便再重新传代，细胞也无法回到原本的特性【xìng】。（如：单层细胞，没长满【mǎn】就发生堆叠现象）。

解决方案

尽量避免融合度过高，镜下监视融合度约达到80%即可传代。

细胞融合度：在细胞培养中指的是细胞在培养表面（培养皿/瓶）所占的比例。

传代密度过低

贴壁培养的细胞，若细胞培养到4-25%密度需要【yào】开始传代，在传代接种细胞密度过低，细胞间距离太远，就无法在细胞间产生黏附及通信作用，帮助信号传导并活化细胞；总体细胞量不足，分泌的生长因子浓度会不足以产生利于生长的微环境，以上皆会造成增【zēng】殖【zhí】速度迟缓或细胞死亡。

解决方案

细胞传代时，要进行准确的细胞计数，确保接种的密度。

如何确定细胞的正确初始接种密度? 

美国细胞库（ATCC）建议各类不同细胞株接种密度：

来源：

https://www.atcc.org/support/faqs/8e032/Seeding%20Density%20for%20Cell%20Lines-25.aspx